无标记溶液内分析技术用于直接研究自然状态的分子。 它们可生成生物学相关数据,让我们在不使用人工探针或标记的情况下就能够了解分子相互作用。 这是一个重要优势,因为标记会扰乱对结合而言至关重要的更高阶结构,导致数据出现假象,甚至使目标分子失活或变得不稳定。

微量热法是一种强大、成熟的无标记溶液内分析技术。 通过测量所释放或吸收的热量变化,微量热计可用于检测分子复合物的缔合与离解。 由此得到的富含信息的数据可以让我们深入了解分子相互作用的生物学过程和机制。 无标记技术对众多应用领域的研究人员都具有吸引力,如生物学研究、生物治疗药物和小分子药物的发现与开发、免疫原性研究、疫苗的开发和质量控制。

这些生物学过程通常采用两种量热技术进行研究:等温滴定量热法 (ITC)差示扫描量热法 (DSC)

微量热法不需要标记,需要的分析开发量最少,方便、快速,适合浑浊和彩色溶液。

  • 等温滴定量热法 (ITC) 可以在一次实验中量化结合亲和力 (Kd)、结合化学计量D)、结合化学计量 (n)、焓 (ΔH) 和熵 (ΔS),并能够进行结合机制说明和酶动力学测定。 数据可用于评估靶标活性、苗头化合物验证和先导化合物优化。
  • 差示扫描量热法 (DSC) 评估热稳定性 (Tm),并解决诸如蛋白质是否正确折叠、是否均质和具有热稳定性这类问题。 例如,该重要信息可用于评估可制造性和最佳配方。