基于标记的传统方法通常要求对单个生物测定成分进行标记,以实现检测。许多传统生物测定使用固定配体从溶液中捕获目标分析物,然后使用专用检测试剂来分析这两个分子之间的相互作用。
这些方法的示例包括酶联免疫吸附检测 (ELISA) 或基于微珠的流式细胞分析。标记可能会改变生物分子的结构和/或功能,并使实验结果出现偏离。在某些情况下,它们可能会完全灭活正在研究的生物分子。
此外,标记成分与其他生物测定成分的非特异性结合可能产生不必要的背景信号。这在处理细胞培养上清液、血清或血浆等复杂样本时尤其会导致问题。
分子相互作用的无标记检测是基于标记的传统方法的一种有吸引力的替代方法。无标记技术(也称作无标记检测或无标记感应)使用基于阻抗或光学的生物传感器来测量分析物与生物传感器表面固定的配体结合时发生的变化。这种方法可以实时监测相互作用,而无需人为操作单个检测成分。
概览无标记技术(此处为创新的 GCI 技术)与下面的传统生物测定技术有何不同。
无标记相互作用分析的优势是什么?
无标记相互作用分析技术用于直接研究自然状态的分子。它们生成的生物相关数据可帮助理解分子相互作用,而无需使用人工探头或标记,因此提供的数据更有可能反映这些分子的自然行为。这对于提供强大的知识体系至关重要,有助于深入了解结构活动关系,开展中央疾病研究以及发现安全有效的药物。
重要的是,无标记技术允许研究人员进行某些分析,而在使用只提供端点结果的传统方法时,根本不可能进行这些分析。这些分析包括动力学和亲合力分析以及结合特异性评估,无标记监测提供的动态实时相互作用分析可支持实现这些分析。
无标记相互作用分析是否适合我的应用?
Malvern Panalytical 提供哪些无标记相互作用分析解决方案?
Malvern Panalytical 提供 WAVEsystem 生物传感器以及 MicroCal PEAQ-ITC 和 MicroCal PEAQ-DSC 微热量计 - 功能强大且成熟的无标记、溶液内分析工具。
WAVEsystem
面向工业和学术研究的药物发现和生命科学的下一代生物分析仪器
生物传感器使用 GCI 技术来建立关键反应参数,比如结合速率常数 (ka)、分离速率常数 (kd) 以及生物分子实时相互作用的平衡解离常数 (KD)。
由此得到的富含信息的数据可以让我们深入了解影响分子内和分子间相互作用的生物学过程和机制。此无标记技术允许在生物传感器表面上固定原生配体。
MicroCal PEAQ-ITC 系列
MicroCal PEAQ-ITC 可提供高灵敏度和高质量的数据,并且样品消耗量很低。
通过测量分子相互作用时所释放或吸收的热量中的变化,MicroCal PEAQ- ITC 可检测分子复合物的结合与解离。
由此得到的富含信息的数据可以让我们深入了解影响分子内和分子间相互作用的生物学过程和机制。
MicroCal DSC 系列
适用于监管环境的蛋白质稳定性分析标准
MicroCal PEAQ-DSC 可以检测当大分子(比如蛋白质或核酸)展开或脂质分子团解离时发生的热量变化。
这通常用于为生物制剂、药物筛选和蛋白质表征的检测开发以及疫苗开发找到稳定条件。