结合动力学

可以使用标记分子（放射性标记、荧光标记等）进行生物分子结合测定，但需要适当的、非破坏性标记，而且通常需要精细的洗涤和纯化步骤。 

在无标记定量分析研究中，待分析的分子之一固定在表面（配体）上，而其他分子则在溶液（分析物）中游离。 

传感图（实时测量的图形显示）显示了实时分析物/配体结合的典型研究。

右侧图像：显示基线期、结合期、分离期和回归基线期的典型传感图。

首先，如传感图所示，确定基线。简单地说，这只是配体的折射率。然后，加入溶液中未结合的分析物，并以此折射率的变化来测量结合。在结合阶段后，将溶液与未结合的分析物去除，并测量解离。虽然传感图中的信号水平与所涉及的配体和分析物及其相互作用的强度相关，但有价值的信息位于其结合和解离的曲率中。例如，药物的预期生物效应与其滞留时间（解离期）关联，而不仅仅与其亲和力关联。

使用单一浓度的单一分析物进样（单循环动力学）进行的测量速度很快，但无法得出所有动力学参数的可靠估计值。传统上，动力学是在多循环动力学实验中测量的：可靠和详细的动力学分析需要至少四至六种分析物浓度的数据，范围为预期 K_D 的 0.1 至 10 倍。这需要在循环之间进行稀释系列和解离步骤。因此，多循环动力学是时间密集型的，不适合筛选数千种候选化合物。 

无再生动力学允许通过跳过再生步骤进行更快的分析。然而，只有当分析物解离缓慢时，才能应用无再生动力学分析，因为这是基于在分析物浓度增加的循环过程中只有少量分析物解离。我们开发了一种革命性的检测方法：在不断增加持续时间的情况下重复执行分析物脉冲 (RAPID) - waveRAPID 将显著减少测定时间和试剂消耗，同时改善读数，以便在药物发现过程中更快且更有把握地识别先导化合物。