结合常数

什么是结合常数?

结合常数是一个动力学参数,用于测量两个或多个分子之间的分子间相互作用和结合事件。结合速率常数(ka、kon 或结合速率)是一个分子与第二个分子结合形成复合物的速率。记录单位为摩尔(分子数量的标准定量)/秒:M-1s-1

如何测量结合常数?

在用生物传感器(如 Creoptix WAVEsystem)分析结合动力学时,一个分子将被固定到生物传感器表面(芯片),该分子称为“配体”。第二个分子在微流体中流过,该分子称为“分析物”。 

首先,使缓冲液流过带有固定配体的传感器来确定基线。之后,再流过样品(分析物)。在结合阶段,分析物与配体结合。由此可以计算结合常数,即分析物与配体在标准浓度下结合形成复合物的速率。这就是它以每秒摩尔数表示的原因。  

结合相互作用测量结果曲线(传感图)。

结合速率和解离速率 (kd) 共同定义了亲和力(平衡解离常数,KD)并确定了结合动力学(两个分子之间的动态相互作用)。KD 以 kd/ka 形式计算,并测定平衡时半数配体被分析物占据时的分析物浓度。

如何用 Creoptix WAVEsystem 测量结合常数?

准确有效地测定分子间相互作用和结合事件是众多基础研究的关键要素,也是药物发现计划不可或缺的组成部分。Creoptix WAVEsystem 是一种光学生物传感器,可在测量结合动力学时测量结合常数。

规格WAVEWAVEdelta
结合常数范围

ka = 103 – 5x107 M-1 s–1(小分子)
ka = 103 – 3x109 M-1 s–1(大分子)

ka = 103 – 5x107 M-1 s–1(小分子)
ka = 103 – 3x109 M-1 s–1(大分子)

表格来自 Creoptix WAVE | 光学生物传感器平台

我还可以使用哪些其他方法测量结合常数?

除了使用光栅耦合干涉技术 (GCI) 的 WAVEsystem 外,测量结合常数的常用方法是生物膜层干涉技术 (BLI) 或表面等离子共振 (SPR)。在我们的技术对比页面上,您可以了解有关 BLI、SPR 和 GCI 功能的更多信息。

WAVEsystem

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面向工业和学术研究的药物发现和生命科学的下一代生物分析仪器