概述

差示扫描量热法 (DSC) 是一种强大的工具,可表征蛋白质和其他生物分子的热稳定性。 此技术测量溶液中分子的热诱导结构转变的焓 (ΔH) 和温度 (Tm)。 该信息让我们能够深入了解使蛋白质、核酸、胶束复合物和其他大分子体系稳定或失去稳定性的影响因素。 数据用于预测包括生物制药在内生物分子产品的保质期,以在小分子药物研发项目中进行批次间和生物相似性与创新分子的比较,研发纯化测量,表征并评估蛋白质结构,以及排序配体对蛋白质靶标的亲和力。

高灵敏度 MicroCal PEAQ-DSC 系统具有自动化数据分析的特性以支持生成高度完整的热稳定性数据,并符合法规要求,同时可轻松集成到现有数据处理和传输系统。 载样后仪器的无人值守操作可节省操作人员的时间。  该完整系统无需额外的附件、试剂或耗材。

主要特点

  • 稳定性指示技术金标准仅需要极少量的分析开发工作
  • 溶液中生物分子的自然状态稳定性的直接和非标测量 
  • 可测量极高的结合常数,最高可达 1020M-1
  • 带吸管和清洁设备的手动系统。
  • 功能强大的 MicroCal PEAQ-DSC 软件可最小化典型数据分析时间并包括:
    • PEAQ-Compliance:通过 Malvern 访问配置器 (MAC) 访问系统以限制对用户定义的 SOP 和数据分析功能的访问。 可使用带用户详细信息和使用电子签名签署功能的“报告生成器”显示数据,以推动将工作流程整合到您公司的质量系统中,并协助符合联邦法案 21 章第 11 款 (21 CFR Part 11) 和 EU GMP 附录 11 (Annex 11)。 这作为可选附件提供
    • PEAQ-Performance:自动化检测并验证系统最佳性能的准备程度
    • PEAQ-Smart(包括 PEAQ-Finder)——适合基于 SOP 的操作和数据分析  提供检测细微峰和峰肩的新算法,协助多个转变的自动、非主观性确认,如在多结构域蛋白质中见到的转变。
    • PEAQ-Compare:用于 DSC 痕迹的定量比较以进行可比性研究,是批次间和生物相似性研究的理想工具
    • 网络准备就绪:分析期间发送的邮件更新以及时通知您分析程序


同样具有 MicroCal PEAQ-DSC Automated(带有自动进样器)以供选择。

工作原理

由蛋白质和其他大分子构成的功能性结构经常发生温度诱导的构象改变,如去折叠。 这些变化导致分子内非共价键重新分配,进而导致热吸收。 差示扫描量热仪可精确测量这种热摄取。

MicroCal PEAQ-DSC 系统的热核包括一个样本池(包含目标样本)和一个参比池(包含匹配的缓冲液),这两个池都包裹在绝热夹套中。 这两个池始终保持相同的温度,并在测量期间以恒定的扫描速率加热。 

随着样本池内的分子去折叠,热被吸收,造成样本池和参考池之间的温度差 (ΔT)。 从而在整个 Peltier 单元内形成热梯度,这就建立了比例电压,该电压被转换成电力以形成到 Peltier 单元的反馈回路,以将 ΔT 恢复为零。

由于蛋白质去折叠是吸热事件,因此在热谱图中可观察为正位移。 该蛋白质“熔化”转变的中点为 Tm,且曲线下面积为去折叠过程中的焓 (ΔH)(请见下方图片)。


数据分析和测量/计算的参数在差示扫描量热法技术页面更详细的说明。

技术指标

常规

技术类型:
差示扫描量热法
测量类型:
温度中点 (TM)
焓 (ΔH)
热容变化 (ΔCp)

样品池

样品池:
毛细管
样品池材料:
Tantalum
样品池容积:
130 μL

样品

样品量:
250 µL(手动注入)
典型样本浓度:
0.01 mg/mL – 10 mg/mL 1
样品处理量:
≤6 个分析样本/8h

系统

噪音:
0.05 μCal/°C 2
基线可重复性:
1 μCal/°C 2
响应时间:
5s 2
重复性:
<0.2 µCal/°C 3
重现性:
<0.08°C St. Dev. TM 和 ΔH <2% RSD 4
系统可重复性:
<0.1°C St. Dev. TM 和 ΔH <5% RSD 4
多重反馈模式:
是(被动、高增益和低增益)
温度范围:
2°C 至 130°C 2,5
最大扫描速率:
240°C/h
逆向扫描:
压力扰动量热法 (PPC):
不适用 - 带指导工作流程的手动清洁设备
清洗溶剂:
水和洗涤剂 (Contrad 90) 作为标准

软件

21 CFR 第 11 部分:
是,有 PEAQ-Compliance 软件选项
已连接网络:
是,有电子邮件警告功能

运行环境

操作温度(°C):
+10°C 至 +28°C
储存温度:
-20°C 至 +50°C。
湿度:
10% 至 70%,非冷凝(储存时为 10% 至 90%)
(IP) 等级:
IP21
电源功率:
100-240 V A/C;50/60Hz,70W(样品池),PC 按交付
认证:
CE (EN61010-1),EMC (EN61326-2-1, EN61326-1, FCC, ICES, VCCI),ISO9001:2008

重量与尺寸

尺寸 (宽, 长, 高)::
20 cm × 44 cm × 19 cm
重量:
8.2 kg

注解

:

1 样本依赖

2溶解于 50 mM KAc 缓冲液中的核糖核酸酶 (RNase) 在 pH 5.5 和 60°C/h 的高反馈条件得出的典型结果

3 稳定缓冲液的重新扫描

4 使用核糖核酸酶 (RNase)

5 根据需要,范围可降至 -10°C

支持

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