在这篇技术说明中，我们展示了 Creoptix WAVE 的高灵敏度。由于格栅耦合干涉测量 (GCI) 技术测量的传感领域扩大，即使在非常低的响应下也可以进行高分辨率的动力学测定，从而能显著降低材料成本。
在分子相互作用的无标记分析中，质量传输限制是造成偏离一级动力学的重要原因。由于体液和表面之间存在分析物浓度梯度，在产生可测量的结合信号所需的高密度配体固定水平下，质量传输限制尤其明显。
使用专有的格栅耦合干涉测量 (GCI) 技术，Creoptix WAVE 比传统表面等离子体共振 (SPR) 方法具有更高的灵敏度，特别是针对低配体固定水平的弱活性蛋白。这可以转化为即使在非常低响应时也能提供可靠动力学 (Rmax <1)。
通过表征乙酰唑胺和碳酸酐酶 II 的相互作用，使用不同的酶固定密度，我们表明 Creoptix WAVE 可以在避免质量传输限制的同时，极大减少样品消耗。
| CAII 捕获水平
(pg/mm2) |
kon (M-1.s-1) |
koff (s-1) |
km | Rmax (pg/mm2) |
KD (nM) |
|
|---|---|---|---|---|---|---|
| 动力学数据 MTL 模型 | 8100 | 1.29x106 | 0.0418 | 6.12x106 | 18.688 | 32.5 |
| 动力学数据 1:1 模型 | 1240 | 0.77x106 | 0.0324 | - | 0.469 | 42.3 |
表 1：乙酰唑胺与不同密度碳酸酐酶 II (CAII) 结合的动力学数据
图例：(A) 传感图显示了乙酰唑胺（分析物，分子量 222.25 Da）和碳酸酐酶 II（CAII，配体，分子量 29 kDa）在低和高固定密度下的相互作用。如所示，在不同固定密度下，在 4PCH WAVEchip 上捕获 CAII。在每个固定水平记录乙酰唑胺的剂量-反应曲线。使用 Creoptix WAVEcontrol 软件，当相互作用偏离 1:1 模型（右）时，使用质量传输限制 (MTL) 模型对来自高固定水平（左）的数据进行拟合。(B) 数据显示，在低固定化水平下的动力学拟合不受质量传输限制，而是遵循一级动力学。
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图 1：乙酰唑胺与不同密度碳酸酐酶 II (CAII) 的结合
