为什么你需要测量mRNA-LNP表面电荷(以及如何做到这点)

为什么你需要测量mRNA-LNP表面电荷(以及如何做到这点)

在以前的博客中,我们介绍了脂质纳米颗粒(LNPs)尺寸的重要性及其测量技术。现在,我们将注意力转向表面电荷,为您提供为什么和如何最好地测量表面电荷的专业见解。 


表面电荷:LNPs的关键测量值

近年来对LNPs的兴趣激增。而原因不难理解——这些微小的载体有可能靶向某些最具挑战性的医疗状况,并且可以在一般载体无法实现的规模上制造。 

开发和制造基于LNP的疗法和疫苗仍然是一项巨大挑战。由于LNPs非常复杂,分析表征极具挑战性——很难知道要测量哪些属性,哪些分析工具可以帮助解答您的问题。 

深入了解表面电荷测量

那么,表面电荷的问题是什么?为什么要测量它?它能告诉你什么? 

表面电荷——也称为zeta电位——是LNP开发过程中一个至关重要的属性。它不仅提供了关于疗法体内命运和活动的见解(表面电荷或许是溶解度和细胞膜相互作用的最重要决定因素),还可以提供关于LNP表面化学的信息(以及任何在开发和制造过程中可能发生的修饰)。 

ELS——表面电荷测量的首选工具

Illustration of a capillary cuvette used in zeta potential measurements 
图1 用于zeta电位测量的毛细管比色皿示意图

电泳光散射 (ELS) 是测量LNPs在特定介质中所获电荷的首选技术。 

ELS 是一种简单的技术,基于电泳原理。LNP 溶液被引入一个含有两个电极的单元(见图 1),在其上施加电场,带电颗粒(在本例中为 LNPs)以与其 zeta 电位相关的速度向相反电极迁移。 

激光从单元底部通过,带电颗粒散射光。由于散射光的频率随颗粒速度成比例变化,通过这种方式测量速度可以使分析师计算出 zeta 电位。 

通常,ELS 用于在磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 或您样品的 10 倍稀释版本中探索 LNP 表面电荷,从而分析师可以验证 LNP 的表面电荷或评估不同 LNP 配方的稳定性和预测摄取效率。 (当然,还有许多应用 ELS 表征 LNP 的好理由,您可以在电子书中了解到。) 

获得最佳表面电荷测量

值得一提的是,几个因素会影响颗粒的zeta电位,包括: 

  • pH的变化 
  • 离子强度 
  • 溶液中其他组分的浓度 

为了确保 zeta 电位测量的可重复性,务必报告您在测量中使用的样品缓冲液以及相应的导电性,以得到的 zeta 电位值。 

克服一个关键挑战

即使您在zeta电位测量中考虑上述建议,您仍可能受到zeta电位测量中最大挑战的影响:高导电性样品。 

LNP分析电子书

想了解更多关于这个挑战以及如何最好地克服它以确保最准确的表面电荷测量?那么请查看我们由分析专家开发的充满见解的电子书,“克服LNP载体分析中的挑战:关键工具、技术和考虑因素。 

在这里,我们涵盖了一切您需要知道的,以更自信地表征您的 LNPs,帮助您

  • 获得更深入的见解
  • 最小化样品使用
  • 节省时间
  • 并降低成本。 

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