泰勒分散分析 (TDA) 是一种微毛细管流技术,可基于溶液对小分子、多肽和蛋白质及混有这些物质的样品进行测定。 该分析将一纳升样本脉冲注入匹配缓冲液的一个层流,然后通过测量时间浓度曲线(或泰勒图)完成分析。 通过对此泰勒图进行分析,可确定分子分散系数,从而确定溶质分子的流体力学半径。

紫外吸光度用于沿微毛细管检测固定窗口位置的靶标分子,其采用不同的波长,可以优化测量灵敏度和选择性。 根据匹配样品缓冲液确定基线的能力能够对溶液中生物分子的粒度和稳定性进行无标记表征,即使是在存在由看不见的赋形剂和表面活性剂组成的复杂混合物的情况下,均可使用此技术进行有效渲染。

采用紫外区成像检测的泰勒分散分析提供质量加权测量,该测量不会因为存在少量团聚体而对测量造成负面影响,这意味着无需稀释或过滤即可运行样本。

泰勒分散测量的原理如下所示:

 

  • 在维持驱动压力不变的情况下,将若干纳升的样品脉冲注入(t0 处)微毛细管中匹配缓冲液的一个层流
  • 样品脉冲流经微毛细管时会因分散(轴向)和扩散(径向)而变宽
  • 沿微毛细管在固定窗口进行的紫外检测用于分析样品脉冲横截面(从 t1 至 tn)处的吸光度
  • 吸光度绘制为时间函数,以生成浓度曲线或泰勒图
  • 泰勒图的宽度与样品中溶质的分子分散系数 (D) 相关,从而可以确定流体力学半径 (Rh)

由于采用能够提供质量加权分析的紫外检测,因此可以使用泰勒分散分析对混合物(例如,单体或寡聚体)中的不同粒度总体进行检测。 使用与粒度无关的特性观察分子贡献的能力对配方开发过程中的困难样品表征提供了潜在优势。 此类样品包括稳定性研究过程中的生成物,例如,聚集溶液、赋形剂配方或复杂生物介质中的物质。