在这篇技术说明中，我们展示了如何使用 Creoptix WAVE 来精确测量弱结合分子的快速解离率动力学。由于小柱设计能够实现 150 ms 的超快速转换时间，现在可以轻松发现低效命中结果，从而更成功地研发药物。
如在基于片段的筛选库中发现的那些弱结合物，通常通过亲和力而非动力学来排序。这是因为标准仪器缺乏测量快速解离率的能力。然而，测量亲和力而非解离率会产生大量假阳性结果，延长工作流程并产生不必要的成本。
采用专有的格栅耦合干涉测量 (GCI)，Creoptix WAVE 可以提供了高达 10s-1 的快速解离率分辨率。这使得能够在早期阶段准确选择真实命中结果，从而极大提高效率。
通过测量甲基磺酰胺与碳酸酐酶 II 的结合动力学，我们发现 Creoptix WAVEsystem 在极快的解离率下也能实现出色的分辨率，即使靶标与分析物的分子量比值很大。
| 动力学数据 | |||
|---|---|---|---|
| Creoptix WAVE | Biacore™ S51 | ||
| kon (M-1 s-1) | 9.36 x 103 | kon (M-1 s-1)
|
8.05 x 103 |
| koff (s-1) | 2.86 | koff (s-1)
|
2.21 |
| KD (uM) | 306 | KD (uM) | 274 |
表 1：动力学数据与发表论文数据的比较：Myszka, David G. “Analysis of small-molecule interactions using Biacore S51 technology.”Analytical biochemistry 329.2 (2004): 316-323.
图例：(A) 甲基磺酰胺 (95.1 Da) 与碳酸酐酶 II (29 kDa) 结合的传感图，碳酸酐酶 II 通过胺偶联固定在 WAVEchip PCH 上，8500 pg/mm2，流动池 1。在 40Hz、流速 200 μL/分钟下采集数据。(B) 放大的结合相（左）和解离相（右）,下面的残差分布图显示出动力学高清晰分辨率。
![[图 1 TN201101-Creoptix-fast-off-rates-to-reduce-false-positives.jpg] 图 1 TN201101-Creoptix-fast-off-rates-to-reduce-false-positives.jpg](https://dam.malvernpanalytical.com/8ddb9b09-3dfd-400a-91e2-ae360106df9b/Figure%201%20TN201101-Creoptix-fast-off-rates-to-reduce-false-positives_Original%20file.jpg)
图 1：甲基磺酰胺 (95.1Da) 与碳酸酐酶 II (CAII) 结合。1 pg/mm2 = 1 RU
