指南：分子量测定 – 使用Zetasizer

使用Zetasizer软件进行分子量测量？

首先有几点警告：总体来说，分子量或Mw测量并不容易，需要时间、良好的样品制备技 能以及耐心。如果您是Malvern Zetasizer的新用户，最好先熟悉动态光散射（DLS）这一快速、用户友好的且具有较高容错的技术。{{如果您已经有经验并想深入了解Zetasizer，请访问光散射技术的进化}}。

好的，说完这些，软件可以处理静态光散射，采用相对简单的浓度序列方法。所需的仅仅是：

• 一个散射标准（通常默认为甲苯）
• 分散剂或溶剂（样品材料在其中分散）
• 分散剂中的一系列浓度（5种或更多不同的浓度是个不错的选择）

我们推荐使用高质量的玻璃或石英比色皿，以避免由于划痕、壁厚变化、制造缺陷等导致的绝对散射强度的偏差。

软件中的浓度计算器（免费下载）可以对分子量测量的适当浓度范围提供指导。这可以通过工具 – 计算器 – 浓度实用程序中访问。例如，对于预期分子量为75,000的样品，0.2至2.0 g/L的浓度范围是合适的。（这只是一个估计的指导建议，范围外也可以有效）。

对于SOP（标准操作程序或测量方法）的设置，大多数“测量类型分子量”的设置都是不言自明的。强烈建议同时进行尺寸测量并选中保存部分结果的设置（即不适合的相关函数），无论如何。

在分子量测量方法中进行尺寸测量，将更容易帮助解决任何意外结果。

为什么分子量完全错误？

可能会有几个潜在原因结合在一起，导致意外结果。

1. 样品制备。散射强度是样品中所有贡献的总和，这会导致平均分子量。聚集体、灰尘、杂物都会对此平均值产生影响。通常情况下，过滤、离心或色谱可能对“清理”样品有帮助。进行DLS尺寸测量以确认。
2. 分散剂不纯净。与第一点相似，尤其是在分散剂或溶剂的测量结果不准确时，这会影响总体结果。
3. 不合适的散射标准。甲苯可能降解，可能需要过滤，避免与水接触，因为这可能会导致胶束，比色皿可能不干净。甲苯的目标计数率应为150-350 kcps（在Zetasizer Nano ZS中为400-700 kcps）。进行DLS测量以确认颗粒的不存在。
4. 不正确的dn/dc值。这是方程的一部分，以其平方的形式进入，dn/dc的20%误差意味着分子量的40%误差。
5. 不正确的样品浓度值。样品材料未完全溶解，过滤过程中材料损失

如果这些都不是问题，请将数据发送给我们。

对于常规分子量测量，使用GPC！

静态光散射可能很麻烦。如果您经常需要这些信息，最好考虑将光散射与分离技术结合使用（通常称为SEC-MALS）如色谱（例如OMNISEC），因为由于分离机制，样品始终被自动“清理”。

希望以上内容能帮助您在Zetasizer上改善分子量测量。

有关Zetasizer及其功能的视频讲解可在这里找到：光散射技术的进化。

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