多角度光散射 (MALS)
什么是多角度光散射 MALS / MALLS?
光散射是指光从包含分子或颗粒的样品中重新辐射的现象。这种散射取决于设备的光学配置,在一个典型的实验中,光会在一个或多个不同的角度被检测到。
在单角散射的情况下,最常见的设计是90度(也称为右角光散射或RALS),7度(也称为低角光散射或LALS),或173度(也称为非侵入性背散射或NIBS)。在多角度设置中,原则上分为固定角度的(这通常被称为MALS或MALLS*设置)和可变角度的(通常称为光散射测角仪或分光光度计)。当人们谈论MALS时,通常是指作为体积排阻色谱(SEC)设置的一部分的多固定角度系统。MALS最广泛的应用是作为绝对分子量探测器,与浓度探测器(如RI或单波长UV)结合使用。
MALS系统中的角度数量可以在2到20个角度之间变化,其中在每个角度同时检测散射。虽然任何光散射探测器(单角或多角度)都可以测量分子量,但获得光散射数据作为散射角的功能的主要好处是可以计算回转半径(Rg)或均方根(RMS)半径,以得出分子的尺寸。在SEC场景中,通常散射分子非常小,有时小到角度依赖性可忽略不计,因此无法测量回转半径(这些系统的典型规格限制约为~10nm)。
- 当光散射在不同角度几乎没有变化时,该分布也称为等向型。(=所有角度相同,即无法检测到Rg)
- 当光散射随角度可检测地变化时,该分布也称为非等向型。(=并非所有角度相同,即可检测到Rg)
无论是哪种情况,分子量 Mw 都可以无论各向异性地获得,因为它仅与0°散射角的散射有关。虽然原则上来自单角检测器的数据可以提供足够的信号来获得Mw,但诸如”更多角度更好”的假设可能会导致研究人员使用多角度检测器,并以Rg测量的额外好处,以防各向异性可能影响结果。Malvern关于静态光散射技术的白皮书包含一个很好的详细总结,可供进一步参考。
附言:Malvern Instruments 在1980年代制造了第一个多角度激光光散射光谱仪,也见于Analytical Chemistry vol 61 no8, page 545A (1989)
*术语MALLS中的额外字母L来自激光:多角度激光光散射。近年来,MALS这一术语相比于前一个缩写更受欢迎,两者表达相同的概念。
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