通往卡路里计大师之路 Vol.5 自己解决问题 第1部分～第2部分

本文中的人物和故事均为虚构。
有关技术的内容，我们得到了大阪府立大学客座研究员深田老师的建议。

可从本文底部下载相关资料。请务必查看。

终于到了关于ITC的最后介绍。我们所提供的信息，是否能对您的研究有所帮助呢？
这次，我们将一边展示实际数据，一边说明在获得异常数据时该如何处理。

仲村先生。今天的ITC培训就要结束了。您是不是已经充满信心了？

是的！多亏了深田老师，我认为已经可以掌握实验操作和分析。谢谢您！

太好了。那么今天，我想谈谈仲村先生今后可能遇到的测量问题，并展示一些实际数据。

请多指教。

第1部分

常见的ITC问题 来思考其根本原因！

仲村先生至今已经经历了一些问题，对吗？

滴定注射器无法清洗，DP值没有达到设定值等。

是的。那么现在，我们列出一些可能发生在系统而不是数据上的问题。

有很多种情况。

是的。但如果您理解这种现象发生的原因，您可以自行解决问题。让我们一起来思考吧。

是的，请多指教。

第2部分 基线位置异常！为什么！

首先复习一下，为什么在ITC中信号会向上或向下偏移？

当样品细胞内的样品发生相互作用导致热量变化时，会与参考细胞产生温差。为了弥补这一点，例如在放热反应发生时，会有降低温度的反馈，信号就会向下偏移，对吧？

没错。如此一来，ITC系统对发生在样品细胞内部的热量变化进行控制，以消除与参考细胞的差异。因此，当样品测量前的基线DP值低于设定值时，就暗示样品细胞内的温度较参考细胞高。这可能是由于这里显示的原因。

我以前听过空调的故事。滴定注射器导致样品细胞内温度发生变化，并反映在DP上。这是指这根滴定注射器吗？

不，在这种情况下，滴定注射器“物理上”会撞到细胞。
物理撞击？？
如果滴定注射器弯曲并撞到细胞内部，就会产生摩擦热，对吗？

这种情况也会发生！

此外，对于iTC200型号，如果滴定注射器的螺母部分松动，注射器可能不会正确设置在位置上，从而撞到细胞的底部。

补充说明。在VP-ITC模型中，如果注射器弯曲或高度未正确调整，也会发生类似现象。此外，即使开始测量，DP仍持续显示为负值时，也可能是注射器弯曲或撞击造成的。

转速呢？

转速较快时，摩擦更容易发生，因此DP值往往会降低。

明白了！基线下降是因为某些原因导致样品细胞内温度升高，是这样吗。那么温度设置的影响呢？

这些数据是通过VP-ITC获取的，Referene Power设置为11 μcal/sec，并绘制了在改变测量温度时基线DP值的变化。测量温度越高，DP值越有可能降低，但在实际测量室温的情况下影响不大。

是的。

到目前为止，我们已经看到了系统导致的基线位置异常的影响。那么仲村先生，除了系统之外，还有什么可能影响基线位置呢？

根据我的经验，当溶液中有气泡或细胞被污染时，会影响基线位置。

说得对。通过监控滴定开始前的DP值，可以判断哪个细胞中混有气泡。通常，设置好的Reference Power会使DP值保持在±1 μcal/sec以内。如果样品细胞中有气泡，DP值会偏低，参考细胞中有气泡时，DP值会偏高。你明白吗？

是的！当样品细胞被污染时，DP值也会偏低，对吧。

是的。在大多数情况下，DP值不稳定是因为样品细胞被污染。如我之前所述，每次测量后习惯性使用14% Decon 90（或20% Contrad 70）清洗样品细胞，以确保系统处于良好状态。请不要吝惜时间，进行维护保养。

是的，明白了！！另外，如果在滴定注射器一侧的样品中有气泡，数据会有何表现？

待续…